本作的故事线发生在TV动画《刀剑神域》第一季没有呈现的艾恩葛朗特第五层。除了老朋友桐人、亚丝娜、情报商人阿尔戈以外,新角色米特也将登场,加入战斗。而米特与亚丝娜的关系也让观众猜测不已。本部剧场版中,知名声优松冈祯丞、户松遥将继续为桐人、亚丝娜配音,为刀剑神域注入灵魂。井泽诗织将为情报商“老鼠”阿尔戈配音,声优水濑祈也将加盟为新角色米特献声,声优阵容堪称豪华。谈及拍摄《巨齿鲨2》最大的挑战,杰森·斯坦森表示是身穿盔甲潜水并在海底漫步,吴京则表示最大的挑战是语言问题,“我的角色是一名科学家,有大量绕口令式的英文,还需要我介绍杰森鼻窦进水的情况,弄得我脑子要‘进水’了。”